一、空白制作
抽取2.5毫升提取液+100微升酶+100微升顯色劑(30℃溫度下培養(yǎng)15分鐘),然后將100微升底物搖勻倒入比色皿中即可放入儀器*通道中(空白必須*通道操作)注:儀器重開機(jī)后要重新制作空白值。
二、樣品檢測
取1g樣品剪碎,用5毫升提取液浸泡10分鐘(如果有震蕩器、超聲波時(shí)間可縮短至2分鐘左右) 取2.5毫升浸泡液+100微升酶+100微升顯色劑(在30℃溫度下培養(yǎng)15分鐘),將100微升底物搖勻倒入比色皿中即可放入儀器。
當(dāng)抑制率 50%時(shí),表示蔬菜中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥超過國家標(biāo)準(zhǔn),抑制率 50%的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。
空白對照測試:
*步:按下 校準(zhǔn) 鍵。
第二步:打開儀器門蓋,將裝有對照液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器蓋,按下 空白 鍵,儀器進(jìn)行空白檢測。
第三步:空白對照檢測結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示空白樣品對照測試結(jié)果Ao,打開儀器蓋取出對照。
樣品測試;
*步:按下 校準(zhǔn) 鍵。
第二步:打開儀器門蓋,將裝有樣品液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器蓋,按下 檢測 鍵,儀器進(jìn)行樣品檢測。
第三步:檢測結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示通道農(nóng)藥殘留檢測樣品的測試結(jié)果Ai,儀器自動(dòng)保存對照對照值和檢測結(jié)果,打開儀器蓋取出樣品。
【注】樣品的抑制率在40%--50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品,若重復(fù)數(shù)次后抑制率仍大于50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn),建議用氣象色譜等儀器做進(jìn)一步的檢測。
檢測結(jié)果打印:在顯示農(nóng)藥殘留檢測儀結(jié)果的界面,按 打印 鍵,儀器開始打印。
2.結(jié)果判定
結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。
當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率 50%時(shí),表示蔬菜中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。抑制率 50%的樣品需要重復(fù)檢測2次以上。
對抑制率 50%的樣品,可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
3.酶抑制法技術(shù)指標(biāo)
(1)靈敏度指標(biāo)
酶抑制率法的zui低檢測限應(yīng)達(dá)到以下指標(biāo):甲胺磷0.8mg/L,敵百蟲0.25mg/L,呋喃丹0.002mg/L。
(2)符合率
在檢出的抑制率 50%的10份以上樣品中,經(jīng)氣想色譜法驗(yàn)證,符合率應(yīng)在80%以上。
特別提示:
1.農(nóng)藥殘留檢測儀重新開機(jī)后,必須重新制作空白數(shù)值。
2.試劑的保存及注意事項(xiàng)【空白制作】抽取2.5毫升提取液+100微升酶+100微升顯色劑(30℃溫度下培養(yǎng)15分鐘),然后將100微升底物搖勻倒入比色皿中即可放入儀器*通道中(空白必須*通道操作)注:儀器重開機(jī)后要重新制作空白值。
【樣品檢測】取1g樣品剪碎,用5毫升提取液浸泡10分鐘(如果有震蕩器、超聲波時(shí)間可縮短至2分鐘左右) 取2.5毫升浸泡液+100微升酶+100微升顯色劑(在30℃溫度下培養(yǎng)15分鐘),將100微升底物搖勻倒入比色皿中即可放入儀器。
當(dāng)抑制率 50%時(shí),表示蔬菜中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥超過國家標(biāo)準(zhǔn),抑制率 50%的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。
空白對照測試:
*步:按下 校準(zhǔn) 鍵。
第二步:打開儀器門蓋,將裝有對照液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器蓋,按下 空白 鍵,儀器進(jìn)行空白檢測。
第三步:空白對照檢測結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示空白樣品對照測試結(jié)果Ao,打開儀器蓋取出對照。
樣品測試;
*步:按下 校準(zhǔn) 鍵。
第二步:打開儀器門蓋,將裝有樣品液的比色皿放入的通道中,蓋好儀器蓋,按下 檢測 鍵,儀器進(jìn)行樣品檢測。
第三步:檢測結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示通道農(nóng)藥殘留檢測樣品的測試結(jié)果Ai,儀器自動(dòng)保存對照對照值和檢測結(jié)果,打開儀器蓋取出樣品。
【注】樣品的抑制率在40%--50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品,若重復(fù)數(shù)次后抑制率仍大于50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn),建議用氣象色譜等儀器做進(jìn)一步的檢測。
檢測結(jié)果打印:在顯示農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的界面,按 打印 鍵,儀器開始打印。
結(jié)果判定
結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。
當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率 50%時(shí),表示蔬菜中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。抑制率 50%的樣品需要重復(fù)檢測2次以上。
對抑制率 50%的樣品,可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
酶抑制法技術(shù)指標(biāo)
(1)靈敏度指標(biāo)
酶抑制率法的zui低檢測限應(yīng)達(dá)到以下指標(biāo):甲胺磷0.8mg/L,敵百蟲0.25mg/L,呋喃丹0.002mg/L。
(2)符合率
在檢出的抑制率 50%的10份以上樣品中,經(jīng)氣想色譜法驗(yàn)證,符合率應(yīng)在80%以上。